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PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)及建設(shè)要求

發(fā)布時(shí)間： 2021-11-27　　點(diǎn)擊次數(shù)： 4994次

PCR實(shí)驗(yàn)指的是基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)，其特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加，是分子生物學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)的常規(guī)方法，PCR實(shí)驗(yàn)室廣泛應(yīng)用于生物學(xué)各個(gè)領(lǐng)域，博泰小編帶大家了解PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)及建設(shè)要求有哪些。

一、PCR實(shí)驗(yàn)室布局
PCR實(shí)驗(yàn)室原則上為試劑準(zhǔn)備區(qū)，樣品制備區(qū)，擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域，并設(shè)有專用走廊，各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)緩沖間，工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。不同功能的工作區(qū)應(yīng)是分隔獨(dú)立的，各工作區(qū)有明顯的標(biāo)志，不能直通，如果緊密連接，需安裝物品傳遞窗。前兩區(qū)為擴(kuò)增前區(qū)，后兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū)。

二、實(shí)驗(yàn)室各區(qū)功能及主要設(shè)備
1、試劑準(zhǔn)備區(qū)：主要進(jìn)行試劑的制備，分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑盒用于樣品制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的試劑。本區(qū)主要設(shè)備有天平，冰箱，離心機(jī)，加樣器，振蕩器等。

2、樣品制備區(qū)：主要進(jìn)行樣品的保存，核酸提取，貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定DNA的合成。本區(qū)主要設(shè)備有冰箱，生物安全柜，離心機(jī)，加樣器，振蕩器等。本區(qū)的壓力梯度要求為：相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)檎龎?，以避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染，一般為+10Pa。

3、擴(kuò)增區(qū)：主要進(jìn)行DNA擴(kuò)增。此外，已制備的DNA模板的加入和主反應(yīng)混合液制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。本區(qū)主要設(shè)備有：擴(kuò)增儀，冰箱，離心機(jī)，加樣器等。本區(qū)的壓力梯度要求為：相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，以避免氣溶從本區(qū)漏出一般為-25Pa。

4、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：擴(kuò)增產(chǎn)物的測(cè)定。本區(qū)主要設(shè)備有酶標(biāo)儀，洗板機(jī).加樣器和水浴箱等。本區(qū)的壓力梯度的要求為：相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，一般為-25Pa，以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至其它區(qū)域。

三、PCR實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)系統(tǒng)及壓力控制
各區(qū)域之間應(yīng)具備單間的實(shí)驗(yàn)工藝流，物流，人流與氣流，形成單向流程的保護(hù)屏障，避免實(shí)驗(yàn)室之間的相互干擾，防止氣溶膠擴(kuò)散對(duì)實(shí)驗(yàn)過程造成污染。PCR實(shí)驗(yàn)室并沒有嚴(yán)格的凈化要求，但是為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式，嚴(yán)格控制送，排風(fēng)的比例以保證個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。

四、PCR實(shí)驗(yàn)室裝飾
實(shí)驗(yàn)室圍護(hù)結(jié)構(gòu)應(yīng)牢固，氣密性好；所有陰陽(yáng)角宜采用圓弧過度；墻體內(nèi)壁光潔，不積塵，耐腐蝕，易清洗消毒；地面使用PVC卷材或環(huán)氧樹脂自流坪，材料應(yīng)滿足無(wú)縫隙，無(wú)滲漏，光潔，耐腐蝕的要求。

五、PCR實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)
1、試劑準(zhǔn)備區(qū)，樣品制備區(qū)設(shè)緊急洗眼器，以保證操作人員的安全。
2、幾個(gè)區(qū)域的大小設(shè)置情況，試劑準(zhǔn)備區(qū)，擴(kuò)增區(qū)，擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)，空間可以相對(duì)小一些，樣品制備區(qū)要放置生物安全柜和低溫冰箱，空間應(yīng)大一些。

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